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IMVIC – Prueba de Citrato.

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El principio de la Prueba de Citrato se basa en la utilización de citrato de sodio como única fuente de carbono para el metabolismo y crecimiento bacteriano.

Fundamento de la Prueba de Citrato.

Si las bacterias tienen la capacidad de utilizar el carbón a partir del citrato de sodio, pueden extraer nitrógeno del fosfato de amonio contenido en el medio y liberar amoníaco. Éste producto alcalino es capaz de virar el indicador de pH azul de bromotimol de verde para azul, con lo cual se indica un resultado positivo.

Esquema del fundamento de la prueba de citrato
Fundamento de la Prueba de Citrato de Simmons.

IMVIC.

El acrónimo IMVIC, que se refiere a Indol, rojo de Metilo, Vosges-Proskauer y citrato; era muy usado por los epidemiólogos para referirse a las pruebas necesarias para detectar contaminación fecal en agua y comida. Específicamente se usó para distinguir a E. coli de E.aerogenes que típicamente producen reacciones inversas.

Aunque las pruebas individuales de la batería IMVIC se emplean ampliamente para la identificación bacteriana, se usa con poca frecuencia como un conjunto. La prueba de Citrato es una de las más importantes.

La batería Imvic indol, rojo de metilo, VP y Citrato
Batería de Pruebas IMVIC

Medio de Citrato de Simmons.

Se emplea un medio sólido que se coloca en forma inclinada (pico de flauta) y pH final de 6,9 con la siguiente formula:

  • 1g de Fosfato de amonio dihidrogenado.
  • 1g de Fosfato dipotásico.
  • 5g de Cloruro de sodio.
  • 2g de Citrato de sodio.
  • 0,20g de sulfato de magnesio.
  • 15g de agar.
  • 0,08g de Azul de bromotimol.
  • 1 litro de Agua destilada.

Procedimiento de la prueba de citrato.

  1. Se toma la superficie de una colonia bien aislada de un medio primario, tratando de no arrastrar restos del medio que podrían interferir con la prueba agregando fuentes de carbono distintas al citrato.
  2. Luego se inocula el medio estriando sobre el bisel.
  3. El tubo se incuba a 35°C durante 24 a 48 horas.

Interpretación de la prueba de Citrato.

Interpretación de la prueba de citrato: azul positivo, verde negativo.
Citrato Positivo: Azul. Citrato Negativo: Verde.
  • Positivo: Se interpreta como positivo el viraje del medio a color azul o el crecimiento visible de colonias sobre la estría de inoculación.
  • Negativo: no hay crecimiento y el medio permanece verde.

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