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IMVIC – Prueba Voges-Proskauer.

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La Prueba Voges-Proskauer mide la capacidad de algunos microorganismos de producir acetoína a partir de la fermentación de glucosa.

Bioquímica de la prueba Vosges-Proskauer

La fermentación de la glucosa lleva a la producción de ácido pirúvico, un intermediario importante en la glucólisis. A partir del ácido pirúvico, las bacterias pueden seguir varios caminos metabólicos y uno de ellos es la producción de un metabolito neutro denominado acetoína. Ésta vía se conoce como Butilenglicólica.

En presencia de oxígeno atmosférico e hidróxido de potasio al 40%, la acetoína se transforma en diacetilo, y al añadir α-naftol como catalizador se forma un complejo color rojo.

La prueba de Voges-Proskauer se emplea básicamente para separa E.coli (VP-) del grupo Klebsiella-Enterobacter-Hafnia-Serratia (VP+).

Medios y reactivos para la prueba Voges-Proskauer

Se emplea el caldo Rojo de Metilo/Voges Proskauer (MR/VP) o Medio de Clark y Lubs modificado.

  • 7g de Polipeptona.
  • 5g de dextrosa.
  • 5g de buffer fosfato dipotásico.
  • 1litro de agua desionizada.
Para la prueba de Voges-Proskauer se usa el medio MR/VP y los reactivos de KOH y α-Naftol para revelar.

Los reactivos para revelar la prueba más usados son:

  • α-naftol al 5% en alcohol etílico absoluto.
  • Hidróxido de potasio (KOH) al 40%.

Procedimiento para aplicar la prueba Vosges-Proskauer.

  1. Inocular un tubo con medio MR/VP con un cultivo puro a probar.
  2. Incubar a 35°C durante 24 horas.
  3. Una vez incubado, transferir una alícuota (1ml) del medio a un tubo limpio.
  4. Añadir en estricto orden primero 0,6 ml de α-naftol al 5% y luego 0,2 ml de KOH al 40%.
  5. Agitar suavemente para exponer al oxígeno atmosférico y dejar en reposo 10 a 15 minutos para su interpretación.

Interpretación de la prueba Vosges-Proskauer.

VP(+): Color rojo antes de 1 hora. VP (-): permanece amarillo.

 

  • Positivo: Se observa desarrollo de color rojo lo que indica presencia de acetoína.
  • Negativo: color amarillo (del reactivo) en la superficie o cobrizo después de una hora de incubación deben interpretarse como resultados negativos.

 

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